Metóda PCR (polymerázová reťazová reakcia) je "zlatým štandardom" modernej diagnostiky DNA, vysoko citlivou metódou molekulárnej biológie. Metóda PCR sa používa v medicíne, genetike, kriminológii a iných oblastiach. Často a úspešne sa používa pri diagnostike mnohých infekčných ochorení.
Diagnóza infekčných ochorení pomocou PCR
Test PCR umožňuje detegovať nielen samotný patogén, ale aj jediný fragment cudzej DNA v skúmanom materiáli. Skúmaný (biologický) materiál je: venózna krv, epiteliálne bunky a tajomstvo pohlavných orgánov, spermií, slin, spúta a iných biologických výkalov. Požadovaný biologický materiál je určený údajnou chorobou.
Metóda PCR v našej dobe je samozrejme silným diagnostickým nástrojom. Možno jedinou nevýhodou štúdie je jej vysoká cena.
V zozname chorôb, ktorých prítomnosť môže byť stanovená metódou PCR:
- vírusová a bakteriálna pneumónia;
- tuberkulóza;
- osýpky, rubeoly, parotitis;
- infekčná hepatitída všetkých foriem;
- salmonelóza, diftéria;
- Helikobakterióza a choroby spôsobené intestinálnymi infekciami;
- STD (pohlavne prenosné ochorenia): kvapavka, chlamydia, ureaplazmóza, syfilis, AIDS, genitálny herpes, gardnerellez a ďalšie.
Screening STI pomocou metódy PCR
Na rozdiel od tradičných analýz PCR metóda umožňuje detekciu pohlavne prenosných infekcií (STI), aj keď ich príznaky úplne chýbajú. Pre zhromažďovanie biologického materiálu sú ženy vyčistené epiteliálne bunky cervikálneho kanála, muži - škrabanie močovej rúry. V prípade potreby metóda PCR uskutočňuje štúdiu venóznej krvi.
Takže STI test s použitím metódy PCR umožňuje identifikovať:
- vírus ľudskej imunitnej nedostatočnosti (HIV);
- bledý treponemus (pôvodca syfilis);
- Vírus herpes simplex a cytomegalovírus;
- ľudský papilomavírus (HPV);
- chlamýdiu, toxoplazmu, mykoplazmy, ureaplazmy a iných sexuálnych infekcií.
Ak sa analýza PCR vykoná správne, vylúči sa pravdepodobnosť falošných pozitívnych výsledkov. Samostatne by sa mala uviesť ľudský papilomavírus (HPV) a dôležitosť metódy PCR na jeho diagnostiku. Na rozdiel od onkocytologického náteru môže metóda PCR určiť špecifický typ HPV, najmä jeho onkogénne typy 16 a 18, ktorých prítomnosť ohrozuje ženu s tak závažným a často smrteľným ochorením ako je rakovina krčka maternice . Včasná detekcia onkogénnych typov HPV metódou PCR často poskytuje príležitosť zabrániť vzniku rakoviny krčka maternice.
Imunoenzýmová analýza (ELISA) a metóda polymerázovej reťazovej reakcie (PCR): plusy a mínusy
Ktorá diagnostická metóda je lepšia: PCR alebo ELISA? Správna odpoveď na túto otázku neexistuje, pretože v podstate diagnóza s pomocou týchto dvoch štúdií má iné účely. A častejšie sa používajú metódy IFA a PTSR v komplexe.
Test PCR je potrebný na stanovenie špecifického pôvodcu infekcie, môže sa zistiť okamžite po infekcii, a to napriek absencii symptomatického prejavu ochorenia. Táto metóda je ideálna na detekciu skrytých a chronických bakteriálnych a vírusových infekcií.
Na rozdiel od metódy PCR je metóda ELISA navrhnutá tak, aby nezistil príčinu infekcie, ale imunitnú odozvu organizmu, tj detekciu prítomnosti a množstva protilátok proti určitému patogénu. V závislosti od typu detegovaných protilátok (IgM, IgA, IgG) je možné určiť stupeň vývoja infekčného procesu.
Obe metódy a PCR a ELISA majú vysokú spoľahlivosť (100 a 90%). Je však dôležité poznamenať, že analýza ELISA v niektorých prípadoch dáva falošne pozitívny výsledok (ak bola v minulosti chorá osoba s určitou chorobou) alebo falošne negatívna (ak bola infekcia prenesená pomerne nedávno).